PetMeta-testi tehdään käyttäen koirille kalibroitua NMR-spektroskopiamenetelmää (NMR). NMR-menetelmä on kliiniseen käyttöön parhaiten soveltuva metabolomiikan tutkimusmenetelmä, sillä NMR-teknologialla tulokset saadaan kvantitatiivisessa muodossa, tulosten toistettavuus on hyvä, analysointi on nopeaa, menetelmä sopii käytettäväksi suurillekin päivittäisille näytevolyymeille, tarvittava näytemateriaalin määrä on pieni ja menetelmä on erityisen kustannustehokas. Näytemateriaalina käytetään punasoluista eroteltua litiumhepariiniplasmaa paastotetulta koiralta otettuna.

 

NMR-spektroskopiamenetelmä

NMR-spektroskopia (englanniksi: Nuclear Magnetic Resonance) perustuu atomiydinten vuorovaikutukseen magneettikentän kanssa. Molekyylien magneettikentässä aikaansaamat signaalit pohjautuvat niiden kemialliseen rakenteeseen. Molekyylin konsentraatio muuttaa NMR-signaalin intensiteettiä lineaarisessa suhteessa molekyylin pitoisuuteen näytteessä. Osalla testin markkereista konsentraatio lasketaan suoraan yksilöllisen signaalin intensiteetin perusteella, toisilla taas käytetään apuna tietokonemallinnusta.

 

Menetelmän kehitys koirille

Konsentraatioiden laskemisen pohjana on molekyylien kemiallisen rakenteen ja niiden aikaansaamien yksilöllisen signaalien tunteminen. Menetelmän kehityksessä on käytetty sekä spiking-tutkimuksia, joissa puhdistetun molekyylin antamaa signaalia tutkitaan, että yhdistämällä NMR-teknologian tuloksia ulkopuolisten laboratorioiden tuloksiin. Testissä mitattavien pikkumolekyylien pitoisuus mitataan suoraan niiden tunnusomaisista signaaleista. Testipaneelin lipidipaneeli puolestaan pohjautuu koiraspesifiseen algoritmiin, joka on muodostettu ulkopuolisten vertailulaboratoroiden tulosten perusteella.

 

Tulosten lineaarisuus on erinomainen

NMR-signaalin intensiteetti on suoraan verrannollinen atomiydinten määrään. Näin ollen molekyylin konsentraation kasvaessa myös NMR-signaalin intensiteetti kasvaa lineaarisessa suhteessa.

 

Teknologia ei vahingoita näytettä

NMR-menetelmässä näytteeseen ei lisätä reagensseja, laite ei ole suorassa kosketuksessa näytemateriaaliin, eikä näytteen absorboima radiotaajuinen säteily vahingoita näytettä. Näin ollen tällä teknologialla vältytään kaikilta reagenssien aiheuttamilta virhereaktioilta eikä tuloksissa ole päivittäisvaihtelua reagenssi-erien mukaan.

 

Testattavat metaboliitit

Testausmenetelmällä tutkittavat metaboliitit ovat valikoituneet testattaviksi sen perusteella, että ne ovat kvantifioitavissa nopeasti ja kustannustehokkaasti käytetyllä testausmetodilla. PetMeta-testiin on näistä markkereista valittu markkereita niiden merkittävyyden ja aiemman tutkimustiedon perusteella.